تولید آنتی بادی مونوکلونال موشی بر ضد آلفاآمیلازحاصل از باکتری بومی bacillus sp.kr8104

پایان نامه
چکیده

آنزیم آلفا آمیلاز از سویه باکتریایی bacillus sp.kr8104 از 422 اسید آمینه تشکیل شده و 48 کیلو دالتون جرم دارد. این آنزیم یک آنزیم ترشحی میباشد که توسط این سویه به فضای خارج سلولی ترشح میشود. این آنزیم دارای دو فرم بالغ و نابالغ می باشد. آیا آنزیم آمیلاز به صورت نابالغ توسط باکتری ترشح میشود و سپس در محیط خارج سلولی بالغ میشود یا به صورت بالغ به خارج از سلول ترشح میشود؟ سوالی است که در مورد این آنزیم مطرح شده است. با تهی? آنتی بادی مونوکلونال علیه فرم های مختلف آلفا آمیلاز از سویه باکتریایی bacillus sp.kr8104 و استفاده از آن به عنوان ابزار تشخیص در تست های ایمیونولوژی نظیر elisa و immunoblot می توان به این سوال جواب داد. در این مطالعه پس از 3 نوبت تزریق زیر پوستی آلفا آمیلاز به 5 موش از نوع balb/c و تعیین تیتر آنتی بادی اختصاصی با روش الایزا، با به کارگیری پلی اتیلن گلیکول 1500، سلول های لنفوسیت موش های ایمن شده با سلول های میولما sp2/0 ادغام شدند. سپس سلول های به دست آمده از مرحله ی قبل، در محیط کشت حاویhat و سرم 20% کشت داده شدند و بعد از 2 هفته 117 کلون هیبریدوما به دست آمد. برای تشخیص و انتخاب هیبریدوماهای با توانایی ترشح آنتی بادی علیه قطعه یc-terminal موجود در آلفا آمیلاز از bacillus sp. kr-8104 و آنزیم بالغ آلفا آمیلاز bacillus sp. kr-8104 الایزا روی محیط کشت روی کلون های حاصل انجام شد، که بین کلون ها یک کلون با توانایی ترشح آنتی بادی علیه قطعه ی c-terminal موجود در آلفا آمیلاز از bacillus sp. kr-8104 و یک کلون با توانایی ترشح آنتی بادی علیه آنزیم بالغ انتخاب شد. با روش رقیق سازی محدود یک کلون پایدار در تولید آنتی بادی مونوکلونال مورد نظر به دست آمد. آن گاه سلولهای هیبریدوما برای بررسی های بیش تر تقسیم و فریز شد. کلمات کلیدی: قطعهc-terminal آنزیم آلفا آمیلاز، هیبریدوما، آنتی بادی مونوکلونال

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تولید و خالص سازی آنتی بادی مونوکلونال موشی بر ضد فعال کننده بافتی پلاسمینوژن

فعال کننده بافتی پلاسمینوژن (t-pa) یک سرین پروتئازاست که زایموژن غیر فعال پلاسمینوژن را به فرم فعال آن یعنی پلاسمین تبدیل می کند که آنزیم اصلی حل شبکه های فیبرینی تشکیل شده در عروق می باشد.در برخی از پاتولوژی ها غلظت این آنزیم در خون افزایش یا کاهش می یا بد و اندازه گیری آن در خون می تواند در تشخیص نوع پاتولوژی کمک کند. به علاوه این مولکول تا به امروز تنها داروی تایید شده توسط fda برای درمان اف...

15 صفحه اول

تولید آنتی بادی مونوکلونال بر ضد پروتئین نوکلئوکپسید ویروس برونشیت عفونی ماکیان (ibv)

ویروس برونشیت عفونی (ibv) طیور یکی از عوامل بیماری زای ویروسی بسیار مهم است که دارای چندین سروتیپ می باشد.  کنترل مؤثر عفونت های ناشی از این ویروس از طریق واکسیناسیون و تشخیص سریع بیماری قابل انجام است.  پروتئین نوکلئوکپسید ibv (n) یکی از پروتئین های ساختمانی حفاظت شده این ویروس است که برای طراحی کیت های تشخیصی و تولید آنتی بادی منوکلونال مورد توجه قرار گرفته است.  در مطالعه ی حاضر پروتئین n وی...

متن کامل

تولید آنتی بادی مونوکلونال علیه آنتی زن های سطح اسپرم انسان

Introduction: As monoclonal antibodies are potential tools for characterization of soluble or cellular surface antigens, use of these proteins has always been considered in infertility and reproduction research. Therefore, in this study, monoclonal antibodies against human sperm surface antigens were produced. Material and Methods: To produce specific clones against human sperm surface antig...

متن کامل

تولید آنتی بادی منوکلونال موشی بر ضد آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت نوع b

آنتی بادیهای منوکلونال از طریق هیبریداسیون سلولی و تولید سلولهای هیبریدوما که نامیرا هستند ترشح شده و به صورت اختصاصی عمل کرده و یک اپی توپ خاص را شناسایی می کنند. هیبریدوما از ادغام سلولهای لنفوسیت با عمر محدود و تولید کننده آنتی بادی با سلولهای نامیرای میلوما بوجود میآید.از آنتی بادیهای منوکلونال در مطالعات دارویی، تشخیص بیماریها ودرمان برخی بیماریها مانند عفونتها و سرطانها استفاده می شود....

15 صفحه اول

کلون و بیان نواحی متغیر آنتی بادی مونوکلونال ضد egfr در باکتری e. coli به منظور تولید آنتی بادی تک زنجیره ای

گیرنده فاکتور رشد اپیدرمال (egfr) یک پروتئین 170 کیلو دالتونی است که با اتصال به لیگاندهای فاکتور رشد اپیدرمی (egf) و فاکتور رشد تمایز دهندهtgf?) ) باعث القا تکثیر سلولی می شود. فعالسازی مسیر پیامدهی egfr در سلول های سرطانی منجر به تکثیر سلولی، آنژیوژنز، متاستاز و کاهش آپوپتوز می شود. جهت درمان سرطان نیاز به عوامل ضد سرطان جدیدی است که بتواند میان سلول های بدخیم و سلول های نرمال تمایز قائل شود....

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پایه

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023